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超声波细胞粉碎仪的常见问题

发布时间:2012-05-08   点击次数:1742次

一、问:链霉菌超声破碎的,用的方法条件是什么?

答:前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声波细胞粉碎仪进行超声破碎时采用的具体条件是:

   1取细菌的 24 h 培养液于 5 000 rmin  下离心 5 min 收集菌体.

   2用 pH 7的 Na2HPO -NaH2PO  缓冲液洗涤 次,再用该缓冲液将菌体配成 1    的菌悬液.置于 40 mL 大塑料试管内.

   3将大塑料试管置于冰浴中,采用超声波破碎功率 200 W12”探头,破碎 30 s,间歇 30 S)

   4破碎液于 12 000 rmin下高速冷冻离心 30 min,收集细胞碎片和上清液,超声破菌流程与 上述基本一致,就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或 pH8 的 TrisHCl,洗涤一次就可以。另外超声剂量随样品量、菌体改变比较大,功率可以到 400600w,超 5s,停 5s,冰浴,要加终浓度 1 mM 的 PMSF。为确定合适的超声强度和次数,有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。放线菌属于原核生物系统进化树上的(GC)摩尔百分含量(mol%)高的革兰氏阳性菌分枝类群。在做大肠杆菌超声时,采用的是 400W超声波细胞粉碎仪,超55的方法,效果不错,但是用在链霉菌上,似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢,因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。

二、超声波细胞碎仪结构上有啥特点?

超声波细胞碎仪的主要特点有一下几个方面:

  1超声波细胞碎仪可储存5个控制模式。

  2定时数字显示,输出能量由光条显示,0100%连续可调,操作直观方便。

  3超声波细胞碎仪工作方式有间断和连续两种选择,间断工作时,脉冲宽度和间断时间可分别设定。

  4工作时间可由数字定时器控制,达到预定时间自动转变为待机状态,定时范围1min99min

  5手持式超声波细胞碎仪可人为自由控制工作和截止时间,使用灵活方便,适用于少量样品的处理工作。

文章由先欧超声波细胞破碎仪提供


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